Aula prática - Extração do DNA da cebola (Alliun cepa)
DIA 28/03/2012 - PRIMEIRAS SÉRIES.
JALECO OBRIGATÓRIO!
JALECO OBRIGATÓRIO!
OBJETIVOS
Conhecer os princípios básicos da
extração do material genético da cebola, a partir dos tecidos do bulbo.
MATERIAIS
Álcool isopropílico (Isopropanol)
Cebola picada
Solução de lise (quebra): 4 colheres de sopa de detergente
incolor, 1 colher de chá de cloreto de sódio, 75 mL de água.
Papel de filtro
Gelo
2 béqueres pequenos de plástico (50 mL) e 1 béquer de 500 ou
1000 mL
Tubos de ensaio
Banho-maria (~60 ºC)
PROCEDIMENTOS
Pique a cebola em pedaços pequenos;
Coloque no béquer pequeno de plástico (50 ml) 4 colheres de
chá de pedaços de cebola;
Adicione 2 colheres de sopa de solução de lise;
Macere intensamente com o auxílio do bastão de madeira;
Complete com a solução de lise até 25 mL no béquer,
misturando a solução;
Coe a solução, com o auxílio do funil e do papel de filtro;
coloque o filtrado em um tubo de ensaio;
Depois de filtrar a solução, tampe o tubo e o coloque no banho-maria por 15 minutos;
Em seguida, coloque o tubo no béquer com gelo e água,
durante 5 minutos;
Decorrido este tempo, adicione um volume igual de isopropanol
(gelado) ao do tubo e misture vagarosamente (por inversão).
SÍNTESE:
2. As moléculas do detergente
desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares.
O
aquecimento favorece a reação e desnatura as moléculas de DNA.
3. DNA é insolúvel em álcool e
deste modo se separa da solução. O DNA tem também menor densidade que os outros
constituintes celulares, por isso surge na superfície da solução. O álcool
desidrata as moléculas de DNA, fazendo com que elas se aglutinem.
5. Pode-se observar um aglomerado
de moléculas de DNA.
Professora Gisele Rosin - Ciências e Biologia.